脑膜炎奈瑟菌(Neisseriameningitidis)简称脑膜炎球菌,是一种革兰氏阴性菌。一般通过呼吸道传播所引起,常在冬末春初季节发病最为流行。患者以儿童多见,流行是成年人发病亦增多。
脑膜炎奈瑟菌是一种重要的细菌感染,表现为脑膜炎或败血症,或更常见的两者的结合。人类是其唯一的宿主,可定植在人类的鼻咽部粘膜上。多数人感染后表现为带菌状态或隐性感染。只有少数人发展成流行性脑脊髓膜炎,临床主要表现为发热,皮肤瘀斑,脑膜刺激等症状。
脑膜炎奈瑟菌图示
病原微生物学特点
1.肾形或豆形革兰阴性双球菌,直径0.6~0.8um;2.无鞭毛、芽孢,有菌毛;3.营养要求较高,需在含有血清、血液等培养基中方能生长;4.专性需氧,5%CO2条件下生长更佳。最适生长温度为37℃,低于30℃不生长。最适pH为7.4~7.6;5.分解葡萄糖和麦芽糖,产酸不产气;6.脑膜炎奈瑟菌的抗原结构与分类主要分有四种:①荚膜多糖群特异性抗原荚膜多糖群特异性抗原已分成A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W和L等10个血清群和H、I、K三个新血清群,总计13个血清群,其中以C群致病力最强。②外膜蛋白型特异性抗原根据菌外膜蛋白组分不同,脑膜炎奈瑟菌各血清群又可分为若干血清型,但A群除外,其所有菌株的外膜蛋白相同。③脂多糖抗原脂多糖抗原与大肠埃希菌间有交叉反应。④核蛋白抗原核蛋白抗原无特异性,与肺炎链球菌者相同。脑膜炎奈瑟菌致病性
1.致病物质
荚膜:荚膜可抵抗宿主体内吞噬细胞的吞噬作用,增强细菌对机体的侵袭力。菌毛:菌毛可粘附至咽部粘膜上皮细胞表面,有利于细菌在宿主体内定居、繁殖。内毒素:脑膜炎奈瑟菌的主要致病物质是内毒素。病菌侵入机体繁殖后,因自溶或死亡而释放出内毒素。内毒素作用于小血管和毛细血管,引起坏死、出血,故出现皮肤瘀斑和微循环障碍。严重败血症时,因大量内毒素释放可造成DIC及中毒性休克。2.所致疾病人感染脑膜炎奈瑟菌将引起败血症或流行性脑脊髓膜炎。脑膜炎奈瑟菌是流行性脑脊髓膜炎的病原菌。多数人感染后表现为带菌状态或隐性感染。只有少数人发展成流行性脑脊髓膜炎,主要表现发热,皮肤瘀斑,脑膜刺激症状。(1)败血症:该菌自鼻咽部侵入,进入血循环致人体发病。其释放内毒素引起皮肤瘀点、瘀斑,激活补体,血清炎症介质明显增加,较其他革兰阴性菌强5-10倍,也较其他内毒素更易激活凝血系统,因此在休克早期便出现弥散性血管内凝血,及继发性纤溶亢进,进一步加重微循环障碍、出血和休克,最终造成多器官功能衰竭。(2)流行性脑脊髓膜炎:该细菌侵犯脑膜,进入脑脊液,释放内毒素等引起脑膜和脊髓膜化脓性炎症及颅内压升高,出现惊厥、昏迷等症状。严重脑水肿时形成脑疝,可迅速致死。临床类型普通型潜伏期2-3d,长者可达10d。普通型占90%左右。先有上呼吸道炎症,继而病菌从鼻咽部粘膜进入血流,到达脑脊髓膜,产生化脓性炎症。以儿童罹患为主。暴发型暴发型只见于少数病人,起病急剧凶险,若不及时抢救,常于24h内危及生命。以儿童罹患为主。慢性败血症型慢性败血症不多见,成人患者较多,病程可迁延数日。脑膜炎奈瑟菌检测方法1.直接涂片检查(1)瘀血斑:刺破瘀斑血印片或血膜片,革兰染色阴性双球菌,呈肾形成对排列,可初诊。(2)脑脊液:取脑脊液离心后沉淀物涂片经革兰染色,若发现中性粒细胞内或胞外革兰阴性双球菌,呈肾形成对排列,结合临床可确诊。2.细菌培养法将标本接种于血琼脂平板、巧克力琼脂平板,置于5%-10%CO2环境中,35℃培养18-24小时后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整齐、直径1-2mm的小菌落,经涂片证实为革兰阴性双球菌,并进一步根据相应的生化反应等试验予以鉴定。3.生化鉴定主要通过氧化酶、糖类发酵以及培养生长特点进行。4.血清凝集法根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W、L、H、I、K等13个血清群,其中A、B、C群最为多见,约占90%。5.核酸扩增法核酸扩增技术(polymerasechainreaction,PCR),其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸,作为引物,对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端,然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增,使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。6.宏基因组测序宏基因组测序是一种全面性的检测方法,已应用于临床病原体检测。宏基因组二代测序可在1次检测中准确识别几乎所有潜在的病原体(病毒、细菌、真菌和寄生虫等)。治疗药物和疫苗预防对于降低流行性脑脊髓膜炎发病率,控制流行性脑脊髓膜炎的流行是安全和有效的,带菌者或易感人群,可用青霉素,利福平,米诺环素进行药物预防,或应用含有A,C,Y,W-血清型的四价疫苗接种进行免疫预防。mNGS在脑膜炎奈瑟菌中的应用宏基因组测序技术(mNGS)可快速检测病原体,可作为脑膜炎奈瑟菌感染诊断的重要补充手段。一名72岁男性患者,在入院前两周曾接受颅面经鼻蝶窦切除左鞍上脑膜瘤手术,因头痛、恶心、呕吐及持续流鼻水而收治入院。脑脊液培养、脑膜炎奈瑟菌胶乳凝集和细菌16SrRNA检测结果均为阴性,利用mNGS测序结果显示脑膜炎奈瑟菌阳性。脑脊液mNGS深度测序,检测到奈瑟菌属。50S核糖体蛋白L6(rplF)基因的系统发育分析表明,该患者的奈瑟菌种来自干燥奈瑟球菌/粘液奈瑟球菌亚群,与脑脊液革兰氏染色一致(革兰氏阴性双球菌)。而非脑膜炎奈瑟菌。这说明传统检测方法无法鉴定出该患者脑脊液中存在的特异性奈瑟菌。mNGS对患者特异性奈瑟菌感染的确诊,帮助临床治疗缩小了抗生素的使用范围,并确定了静脉头孢曲松靶向治疗的持续时间,最终治愈了患者的脑膜炎。病例的结果,再次印证了脑脊液mNGS检测在临床诊断上的优势。它既可以指导临床医生进行早期的抗感染治疗,也能帮助医生调整治疗方案进行更有针对性的治疗。脑脊液mNGS检测还能鉴别新发感染和疾病表型,这个优势也是弥补了传统检测在临床上的不足。参考文献:
[1]HollingsheadS,TangCM.AnOverviewofNeisseriameningitidis[J].MethodsMolBiol,,:1-16.[2]WilsonMR,SampleHA,ZornKC,etal.ClinicalMetagenomicSequencingforDiagnosisofMeningitisandEncephalitis[J].NewEnglandJournalofMedicine,,(24):-.产品介绍
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